甘草被譽為中藥中的“國老”，其性平、味甜，具有益氣補中、緩急止痛、潤肺止咳、瀉火解毒之功效，尤其是其特有的甜味能蓋過其他藥材的苦味，在兒科處方中較為常見。甘草片屬中成藥，具有鎮(zhèn)咳祛痰作用，主要有效成分為甘草流浸膏。由于甘草品的止咳效果顯著，其在臨床上的應用十分廣泛。正所謂“十方九草”，隨著現(xiàn)代科學技術的發(fā)展，甘草的臨床應用更是越來越廣泛，正是如此大的需求量，市面上的甘草多為人工種植品。有機氯類農(nóng)藥是被廣泛運用的殺蟲劑，但對人體百害無一利，該類農(nóng)藥具有難分解、性質(zhì)穩(wěn)定的特點，故而殘留期長，且容易在人體內(nèi)累積造成慢性中毒，長期的大量使用對環(huán)境已經(jīng)造成了較大的污染，我國在20世紀80年代已停用了有機氯類農(nóng)藥，但目前仍能在中藥中檢出該類農(nóng)藥。
為探究有機氯在中成藥中的殘留，本文由上海泰特睿杰信息科技有限公司色譜技術人員將氣相色譜法用于檢測甘草片中有機氯含量，通過該檢測手段快速、準確地檢測中成藥中有機氯類農(nóng)藥的殘留量。泰特儀器主要產(chǎn)品包括GC2030系列氣相色譜分析儀、GC966系列在線氣相色譜儀、GC966便攜式氣相色譜儀等設備，以及相關配套設備。廣泛應用于石油化工、科研教學、環(huán)境監(jiān)測、食品醫(yī)藥安全、高純氣體行業(yè)、生命科學、司法鑒定等領域。
1、色譜條件
農(nóng)殘檢測專用石英毛細管柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm)；進樣口溫度250 ℃，檢測器溫度300 ℃，柱溫220 ℃。升溫程序為：初始溫度120 ℃，每分鐘升溫10 ℃，升到200 ℃終止，保持終止溫度2 min，從200 ℃以每分鐘2 ℃的速率升溫，升到230 ℃后保持2 min，載氣為高純氮氣，流速為1.5 ml/min，壓力為100 kPa，尾吹氣流量56.3 ml·min-1，進樣量1 μL不分流進樣。
2.2 標準曲線繪制
混合對照品溶液的制備：先制備對照品儲備液，精密吸取α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC、PP′-DDE、OP′-DDT、PP′-DDD、PP′-DDT和五氯硝基苯1 ml，置于25 ml 容量瓶中，用丙酮與石油醚混合有機溶劑稀釋至刻度，儲備液濃度為4.0 μgml-1；精確吸取一定體積的對照品儲備液于25 ml容量瓶中，用石油醚稀釋至刻度，分別配置0.01、0.05、0.10、0.50及1.0 μgml-1不同濃度的一系列對照品溶液；在上述的色譜條件下進樣1 μL，以濃度為橫坐標(X)、峰面積為縱坐標(Y)，建立標準曲線方程。
2.3 精密度實驗
精密吸取一定量標準品溶液，相當于含量5 μg/L，按照2.1色譜條件連續(xù)進樣6次，記錄峰高和保留時間，根據(jù)峰面積計算RSD值。
2.4 重現(xiàn)性實驗
稱取甘草片樣品3份，每份按照含甘草流浸膏粉100 mg為標準，加入30 ml丙酮與石油醚混合有機溶劑，超聲提取25 min過濾棄渣，并用5 ml石油醚洗滌2次并入上述濾液中，濾液放入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中濃縮干，再用石油醚定容并用濃硫酸磺化，2500 r/min離心15 min，靜置取上清液中，再按色譜條件連續(xù)進樣6次，根據(jù)峰面積計算RSD值。
2.5 回收率實驗
稱取相當于含甘草流浸膏粉100 mg的甘草片樣品，制備供試品溶液，分別加入濃度為0.05、0.10、0.15 μg/ml的對照品標準溶液，3個濃度均按2.1色譜條件連續(xù)進樣6次，記錄峰高和峰面積并計算回收率。
農(nóng)藥殘留會污染藥材而影響用藥安全，尤其是高毒性的有機氯類農(nóng)藥，會對人體健康和用藥安全產(chǎn)生極大影響。中成藥的質(zhì)量不僅要相關的有效成分合格，同時農(nóng)殘、重金屬等對藥品質(zhì)量都有影響，對人體健康有危害的物質(zhì)，也應限定在一定范圍內(nèi)。我國是中成藥的生產(chǎn)和消費大國，臨床療效也充分證明了中成藥的獨特作用，但目前中成藥的出口和國外對中成藥的接受程度均受到限制，其中農(nóng)殘是一個很重要的原因，為此加強中成藥的農(nóng)藥殘留分析十分必要。世界衛(wèi)生組織從20世紀80年代就將農(nóng)殘列為檢測項目，我國2000版《中國藥典》開始對農(nóng)殘進行限量要求，特別是《中藥材生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》的實施，對從源頭上控制農(nóng)藥殘留量起到了至關重要的作用。
中成藥成分比較復雜，甘草片中就含有阿片粉、樟腦、八角茴香油、苯甲酸鈉、甘草酸等許多成分，部分化合物的結構、理化性質(zhì)等與有機氯農(nóng)藥相似，使得樣品與有機氯農(nóng)藥的分離、凈化難度增大。為保證檢測結果的可靠性，中成藥中有機氯農(nóng)殘的處理技術一般較為繁瑣，這也是當前有機氯農(nóng)殘檢測中普遍存在的問題。繁瑣的前處理步驟降低了檢測效率和檢測的可靠性，不能滿足實際需要，而建立簡便、快速、可靠的樣品前處理和分離檢測方法，已成為未來中成藥中有機氯農(nóng)殘檢測的發(fā)展趨勢。針對當前中成藥有機氯農(nóng)殘檢測主要集中在BHC和DDT上的特點，本文以石油醚和丙酮為超聲提取溶劑，采用外標法計算含量，并參照《中華人民共和國藥典(2010版)》中“有機氯類農(nóng)藥殘留檢測法”。該檢測相對簡便、快速，其準確度和可靠性高，在實際檢測工作中，不但適用于中成藥甘草片的有機氯檢測，也可以用于檢測其他中成藥樣品中有機氯的農(nóng)藥殘留。
